cDNA由什么构建

2024-01-16 04:12:03 99次

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2024-01-16 04:12:03

cDNA (complementary DNA) 是由反转录酶 (Reverse Transcriptase) 根据 mRNA (messenger RNA) 模板合成的 DNA 长链。

cDNA 反映了 mRNA 上的信息，可以被用于基因表达分析、克隆、序列分析等多种应用。构建 cDNA 的主要步骤包括：

1. 从细胞、组织或生物样品中提取总 RNA (Total RNA)；

2. 利用反转录酶将 mRNA 作为模板进行逆转录反应 (Reverse Transcription)，合成一条长链的 cDNA；

3. 通过PCR扩增产生多个 cDNA 拷贝 (copies)，以便后续的实验分析。反转录酶可以使用多种来源，如细菌、逆转录病毒等。在反转录反应中，通常采用反义寡核苷酸引物 (Oligo dT) 作为启动子，促使反转录酶以 poly(A) 尾作为起始点合成 cDNA 长链。此外，反转录反应过程中可能需要添加脱氧核苷酸三磷酸 (dNTP)、缓冲液、酶切缓冲剂等试剂。

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2024-01-16 04:12:03

cDNA是由RNA通过酶的作用转录构建出来的。

1. 因为在细胞质中, mRNA 作为模板被反转录酶 (Reverse Transcriptase)酶催化的反应所合成生成 cDNA。

2. cDNA是一个非常重要的分子工具，广泛应用于分子生物学，特别是在PCR技术和基因克隆、基因表达研究方面，因为其具有高效性和准确性。

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2024-01-16 04:12:03

cdna文库可以通过逆转录的方法来进行构建。

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