操作时,先要点样。
取少量试样,用水或易挥发的有机溶剂(如乙醇、丙酮等)使它完全溶解,配制成浓度约1%的溶液。在滤纸上距一端约2~3厘米处用铅笔画一记号作为原点,用毛细管或微量注射针筒吸取少量试样溶液在原点滴一小滴,每滴试样体积为0.002~0.02毫升,控制点样直径在0.3~0.5厘米左右。晾干后再在原点处重复上述操作1~2次。将已点样并晾干的滤纸悬挂在层析槽内,并使滤纸下端(有点样一端)边缘浸入展开剂液面下约0.5~1厘米,但点样的位置必须在展开剂液面之上,将层析槽盖上。借助于毛细现象,展开剂带动试样中各组分以不同速度沿滤纸逐渐向上移动,因各组分在固定相和流动相中溶解度不同,从而使混合物中各组分在流动相中移动距离不同而得到展开。有的组分展开后就可显示出不同颜色,但有的组分展开后不显色,还要进行显色反应。一般可用显色剂喷雾法使各组分显色,如分离甲基橙和酚酞时用氨水作显色剂,酚类可用三氯化铁的乙醇溶液显色,也有用紫外光照射显色的。