PCR过程中应用最广的聚合酶是

2024-01-17 15:45:44 251次

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2024-01-17 15:45:44

Taq DNA聚合酶是从一种耐高温细菌中分离提取的。

该菌是1966年从美国黄石国家公园的一个热泉中发现的。实验表明，PCR反应时变性温度为80～100℃；50个循环后，Taq DNA聚合酶仍有65％的活性。Taq DNA聚合酶的热稳定性是该酶用于PCR反应的前提条件，也是PCR反应能迅速发展和广泛应用的原因。Taq DNA聚合酶还具有逆转录活性，其作用类似逆转录酶。Taq DNA聚合酶表现为对依赖，该酶的催化活性对浓度非常敏感。测定结果为浓度在2.0 m mol／L时该酶催化活性最高，此浓度能最大限度地激活Taq DNA聚合酶的活性，浓度过高就会抑制酶活性，因而的浓度在不同的反应体系中应适当调整，优化浓度。Taq DNA聚合酶具有5′→3′聚合酶活性和5′→3′外切酶活性，而无3′→5′外切酶活性，它不具有校正活性。因而在PCR反应中如发生某些碱基的错配，该酶是没有校正功能的。Taq DNA聚合酶的碱基错配概率为2.1×。

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