三个最少三个。
因为为了保证实验能够重复,所以最少三个样品,而且也符合生物统计学的最低样本数。 如果要有效估计参数可以根据有效样本得出n》30或者n》3*(k+1)。 只看你要多大的精度如果精度随着样本数的增加而增加。引物设计可能是PCR扩增成功最关键的因素。如引物设计欠佳,可能导致扩增产物不足,甚至扩增失败,其原因是设计欠佳的引物可导致非特异扩增和/或形成引物二聚体,此又成为PCR反应的竞争性产物,从而进一步抑制PCR产物形成。在引物设计时必须考虑以下几个因素,其中最重要的是引物长度、溶解温度(Tm)、特异性、引物序列互补问题、G/C 含量和多嘧啶(T,C) 或多嘌呤(A, G)延伸、3’-末端序列等。