先设计好正反引物，顺序是5’到3’，分别在5’端加上hindIII和BamHI的酶切位点就可以了。
比如： 正向引物F：AAGCTT-atgcatgctgcatgcatgc 反向引物R：GGATCC-catgcatgatgcacatgcta 按照试验的具体情况，还可以在前面加上保护碱基，这个你在网上可以搜到。如果连T载体再酶切的话，就没什么必要了。 祝你好运！
问如何在引物中加入HindⅢ和BamHI酶切位点
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如何在引物中加入HindⅢ和BamHI酶切位点求高手给解答
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