变性温度是PCR反应成败的关键,复性温度决定着PCR的特异性。
温度越低复性越好,但是容易出现引物与靶DNA的错配,增加非特异性结合,温度太高不利于复性,大多数PCR反应的复性温度在55℃左右。确定了复性温度后,复性时间并不是关键因素。但复性时间太长会增加非特异的复性。蛋白质或核酸的天然构象,在分子遭到变性以后,全部或部分恢复。它通常是特指分子生物学中一类生物大分子物质,尤指脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)。
为什么复性是pcr关键,在线求解答
变性温度是PCR反应成败的关键,复性温度决定着PCR的特异性。
温度越低复性越好,但是容易出现引物与靶DNA的错配,增加非特异性结合,温度太高不利于复性,大多数PCR反应的复性温度在55℃左右。确定了复性温度后,复性时间并不是关键因素。但复性时间太长会增加非特异的复性。蛋白质或核酸的天然构象,在分子遭到变性以后,全部或部分恢复。它通常是特指分子生物学中一类生物大分子物质,尤指脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)。
引物的复性温度就是变性温度后一段温度较低的时期,在该阶段,引物单链和变性期已经解链的模板单链结合,这就是引物退火过程,该过程需要的温度就是复性温度。该温度十分重要,可决定pcr的特异性以及扩增效率。