组织学切片最常用的制备标本的方法是石蜡切片法。
石蜡切片法是一种将生物组织固定、包埋、切片和染色的一系列过程,该方法能够保持组织的形态和结构,适用于光学显微镜下的观察。以下是石蜡切片法的基本步骤:
1. 取材:从供体中切取所需的组织块。
2. 固定:将组织块放入固定液(如Bouin's液)中进行固定,以保持组织的形态和结构。
3. 脱水:将固定后的组织块用梯度酒精进行脱水,逐渐减少水分。
4. 透明:将脱水后的组织块放入透明剂(如二甲苯)中,使组织块变得透明。
5. 浸蜡:将透明后的组织块放入蜡液中,浸泡一段时间,使蜡渗透到组织内部。
6. 包埋:将浸蜡后的组织块放入包埋框中,倒入石蜡熔液,待石蜡凝固后,形成石蜡切片。
7. 切片:将包埋好的石蜡块固定在切片机上,切成薄片(通常厚度为5-10微米)。8. 粘片:将切好的石蜡切片附着在载玻片上,用封片胶密封。9. 染色:对石蜡切片进行染色,如苏木精-伊红染色(HE染色),以便在显微镜下观察细胞和组织的形态。10. 封片:将染色后的切片用封片胶密封,防止染色剂流失。石蜡切片法适用于各种组织和细胞类型的制备,但在实际应用中,也会根据需要采用其他切片方法,如冷冻切片、激光捕获切片等。