革兰氏染色原理及步骤

2024-01-21 16:29:48 196次

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2024-01-21 16:29:48

革兰氏染色法的步骤包含涂片、干燥、固定、初染、水洗、媒染、水洗、脱色、复染、水洗、干燥观察共11步，应注意把握涂片的薄厚、加热温度，脱色时间及各染液质量。

1.涂片：在灭菌后的载玻片中央滴一滴待检样品，用烧红冷却后的接种环将液体铺匀。

2.干燥：载玻片置于酒精灯上加热至水分蒸发。

3.固定：载玻片在酒精灯火焰上快速过2~3次，用2~3秒后待冷却。

4.初染：滴加1~2滴草酸氨结晶紫染液，染色时间约一分钟。

5.水洗：用小水流冲洗载玻片，冲洗至水呈无色。

6.媒染：滴适量革兰氏染液，染色时间约一分钟。

7.水洗：同步骤5。8.脱色：在载玻片上滴加95％乙醇，至流下乙醇不呈紫色，大约用时半分钟后水洗。9.复染：滴加1~2滴沙黄染液，染色时间约一分钟。10.水洗：同步骤5。11.干燥、观察：待标本片干燥后观察，紫色为革兰氏阳性菌，红色为革兰氏阴性菌。应注意涂片时应薄而均匀，不宜过大；干燥时勿紧靠火焰，控制加热时间，防止标本烤枯；固定时，加热温度不可过高；脱色的时间应该根据标本的种类及涂片的薄厚程度进行适当调整，不可机械性的按照统一时间操作；应定期检查使用的染液质量，以免发生误差。

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2024-01-21 16:29:48

革兰氏染色原理的全称是革兰氏染色法，又被称为活细胞染色法，是一种识别细菌以及它们的种类的技术。该技术是根据在染色的生物体内，已附着的染料被细菌代谢成不同的颜色来识别出不同细菌亚种或属的技术。革兰氏染色步骤：

1. 将样品放入 Petri 盘并进行分离；

2. 在分离后的样品上洒上革兰氏染料；

3. 进行细菌特性的观察；

4. 以耐热和耐冷染料来识别细菌不同的染色反应；

5. 根据所观察到的细菌特性对样品进行鉴定。

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