PCR引物的设计原则1.引物应用核酸系列保守区内设计并具有 特异性。
2.产物不能形成 二级结构。
3.引物长度一般在15~30 碱基之间。
4.G+C含量在40%~60%之间。
5.碱基要随机分布。
6.引物自身不能有连续4个 碱基的互补。
7.引物之间不能有连续4个 碱基的互补。8.引物5′端可以修饰。9.引物3′端不可修饰。10.引物3′端要避开密码子的第3位。
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