主要城市有6个。
1，基辅基辅是乌克兰的首都和最大城市，位于该国中北部第聂伯河畔，人口约300万人。这座城市是东欧重要的工业、教育和文化中心，拥有高科技产业和众多高等教育机构，还有许多著名的考古遗址。该市拥有广泛的基础设施和发达的公共交通系统，包括基辅地铁。1991年苏联解体、乌克兰独立后，基辅仍然是乌克兰的首都。
2，哈尔科夫它是乌克兰面积和人口仅次于首都基辅的第二大城市，是最大的工业、科学和文化中心，是最大的学生城市，拥有40多所高等教育机构。这座城市位于乌克兰东北部，洛潘河和哈尔科夫河的交汇处，始建于17世纪（公元1656-1654年），直到20世纪30年代初一直是乌克兰的首都，人口超过100万人，当地还有大约700座古迹，以及博物馆、剧院和展览馆。
3，敖德萨乌克兰共和国的主要城市之一，位于黑海沿岸，该市人民讲乌克兰语和俄语，拥有20多个不同专业的多所大学。它在基辅和哈尔科夫之后排名第三，人口超过100万人，有四个港口和一个国际机场，被认为是该国的经济和旅游之都，官方语言是俄语，尽管乌克兰人占多数。19世纪，敖德萨是俄罗斯帝国仅次于莫斯科、圣彼得堡和华沙的第四大城市。
4，克拉马托尔斯克该市位于顿涅茨克的科若内伊托烈茨河畔；2013年人口为164283人，是乌克兰最重要的工业和机械工程中心之一。这座城市从1868年的一个小火车站公路的一个小定居点发展起来，并逐渐发展成为顿涅茨克北部的一个主要城市。
5，马里乌波尔马里乌波尔市位于乌克兰东南部的顿涅茨克地区，位于亚速海港口，人口超过50万人。它是顿涅茨盆地最大的工业中心，是该国最大的钢铁生产商，也是乌克兰污染最严重的城市之一，因为当地有大量工厂。
6，利沃夫随着俄乌危机升级，乌克兰西部与波兰接壤的城市利沃夫的名字频繁出现。随着“俄罗斯在乌克兰边境的军事集结加速”，美国等西方国家宣布将大使馆从首都基辅迁出，前往利沃夫市。利沃夫的人口为721510人（2021人年的估计），其中88%为乌克兰人，9%为俄罗斯人，1% 为波兰人，其余为少数民族。
