1色谱分析过程中,缓冲液是不可或缺的,因为要用它来调节流动相的pH值,凝胶色谱柱装填完后要立即用缓冲液充分洗涤,主要目的是洗涤平衡,使凝胶装填均匀紧密。
2.洗涤平衡就是保持PH值稳定在某个区间3.缓冲盐使用不当,会造成一些不良影响,如,色谱柱压升高、柱效下降、保留时间异常等等不良影响:
1. 柱压升高;原因:缓冲盐使用不当导致缓冲盐析出,堵塞塞板和键合相颗粒之间的孔隙,阻碍流动相传质,引起柱压升高。
2.相同化合物的保留时间发生变化;原因:如果没有冲洗干净就进行进样,色谱柱内含有的盐会使化合物的保留时间发生变化.3.柱效下降;原因:有些缓冲盐会渗入到键合相的深处,损害硅胶基体,导致色谱柱键合相流失,柱床变松,柱效下降;凝结在键合相表面,使C18碳链难以舒展,对物质的保留能力下降,导致柱效下降。因此用过缓冲盐后需要对色谱柱进行冲洗,水中缓冲盐浓度较大时应特别引起注意。