最常用的染色法

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简单染色方法:涂片→干燥→固定→染色→水洗→干燥→镜检 简单染色流程 (1)涂片:取一块干净的载玻片,并在其中央滴一小滴生理盐水(或无菌蒸馏水)。

接种环在酒精灯上杀菌后从斜面挑取少量菌种(金黄色葡萄球菌或枯草杆菌)与玻片上的水滴混匀后,涂布成一均匀的薄层。涂布面一般以直径1cm大小范围为宜。 (2)干燥与固定:涂片最好在室温下使其自然干燥。亦可在酒精灯上微微加热,加速水分蒸发,但切勿过热。固定时,在酒精灯火焰外层尽快地来回通过2~3次,多为2~3s,以载玻片背面不觉烫手为宜,放置待冷后,进行染色。 (3)染色:在涂片上滴染色液一滴,使染色液覆盖涂片,染色约1min。 (4)水洗:斜置载玻片,在来自水龙头下用小股水线冲洗,直至洗下的水呈无色为止。 (5)干燥:用吸水纸吸去涂片边缘的水珠,置室温下自然干燥或微微加热,以加快干燥速度。注意用吸水纸时切勿将菌体擦掉。 (6)镜检:用显微镜观察,并用铅笔绘出细菌形态图。

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常用的细胞染色方法有:

1、简单染色法,常用碱性染料如美蓝等进行简单染色;

2、革兰氏染色法,主要包括结晶紫初染、碘液媒染、乙醇(或丙酮)脱色以及番红复染四个过程;

3、瑞氏染色法,瑞氏染料溶剂主要是由伊红美蓝组成;

4、吉姆萨染色法,吉姆萨染色原理与结果和瑞特染色法基本相同;

5、细胞免疫荧光染色法,免疫荧光染色的主要原理是利用抗原抗体之间的特异性结合。染色是生物显微玻片标本制作中最重要的环节之一。

先把破坏细胞膜的选择透过性,再使用染色剂,将生物组织浸入染色剂内,使组织细胞的某一部分染上与其他部分不同的颜色或深度不同的颜色,产生不同的折射率,以便观察。

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苏木精—伊红染色法(hematoxylin-eosin staining),简称HE染色法,石蜡切片技术里常用的染色法之一。苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。

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